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    RT-PCR的靈敏度低

    發(fā)布時(shí)間: 2023-06-30  點(diǎn)擊次數(shù): 1543次

    可能原因 1:RNA 問(wèn)題(包括:RNA 被損害和降解;初始模板 RNA 不充分)。

    解決方法:如果全損害或者降解的話,更換 RNA;增加模板 RNA 的濃度;使用 10ng-1μg的總 RNA。

    可能原因 2:儀器故障。

    解決方法:檢查擴(kuò)增儀的溫度;檢查熒光儀器溫度和信號(hào)。如果發(fā)現(xiàn)故障,就趕緊找廠家維修。

    可能原因 3:PCR 擴(kuò)增無(wú)效。

    解決方法:反轉(zhuǎn)錄的抑制劑很多很多,包括 SDS、EDTA、胍鹽、甲酰胺、磷酸鈉和亞精胺等等。一定要注意,不要被這些抑制劑污染了。


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